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还对室内的清洁工作有特殊的要求，室内墙角全部为弧形结构设计，找不到任何一个90°的墙角，使细菌无处藏身，避免了清除不尽的死角，并且室内无须使用物理或化学方法进行消毒，这样既节省劳动又防止外来污染的进入。
层流手术室不仅要求高度洁净的空气（进入手术室的空气首先须经过滤器净化），而且要求能控制气流的流通方向（即采用层流超净装置），手术室内形成正压环境，使气流从洁净度高的手术区域流向洁净度低的区域，一股细小、薄层的气流，以均匀的流速向同一方向输送，并带走和排出气流中的尘埃颗粒（尘粒）和细菌。并提供适宜的温度、湿度，创造一个清新、洁净、舒适、细菌数低的手术空间环境，使患者在手术时组织受到尽可能少的损伤，并大大降低患者和医护人员的二次率，尤其是颅内手术和手术，保证患者术后能更快更好地恢复等。
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（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。层流手术室的空气压力根据其不同区域（如手术间、无菌准备间、刷手间、间和周围干净区域等）洁净度不同要求而不同。（2）严格控制入室人数。（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持'相对密闭状态'，以防外来污染的进入。（4）手术前用酒精擦拭室内物品、程仪器、设备等。（5）术后及时、彻底清洁室内所有物品、墙壁及地面。（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
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洁净手术室的维护原则
1.空气处理机组:梅月检查一次，清扫内部，尤其是对热交换器要用高压水枪冲洗。
2.排风机组中的中效、高1效过滤器每年更换。如做特殊污染手术，每做一例手术必须更换，换下的过滤器必须密封运出，焚烧处理。
3.吊顶送风天花板应14月检查一次，并清洁内部表面(阻翻式天花板除外)。
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手术室常用的无菌术有哪些?
①物品灭菌技术;②外1科刷手术;③穿无菌手术衣、戴手套;④铺无菌器械车及铺无菌巾;⑤无菌持物钳的使用;⑥术中无菌技术操作等。
已打开的无菌包如手术衣包，应无菌操作包好，可保持4h。局部麻1醉药瓶注明开启时间，保留24h。已铺置未用的无菌车、盘保留时间为4h，4h后重新灭菌。
手术人员穿上无菌手术衣后，只有腰部以上到肩的前缘、袖口到手肘上的10cm可视为无菌区。手术进行中，工作人员需调换位工时，应稍离开手术台，背对背地进行互换，并注意不得污染手臂及无菌区域。